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ELISA试剂盒检测不成功的原因

文章来源:http://www.bioleaf.com.cn   时间:2019-03-26

    elisa试剂盒即酶联免疫吸附试验,它是一种常用的固相酶免疫测定方法,由于ELISA方法灵敏,特异性强不需要特殊设备,所以被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因 素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在临床检验中除正常反应外,有时常可见到一些错误结果!
 
    溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性。可能是溶血血清中含有过 氧化酶物质,在洗涤过程中往往难以完全洗脱,它可使 H2O2释放出原生态氧(O),从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质,即显蓝色, 产生假阳性.
 
    标本受细菌污染。因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶,因此,被细菌污染的标本同 溶血标本一样,亦可产生非特异性显色而干扰测定结果。
 
    标本保存不当。在冰箱中保存过久的标本,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、造成 假阳性;为克服上述干扰,ELISA试剂盒测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定,5 d 内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白 质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡。
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