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做ELISA实验需要注意哪些问题?

文章来源:http://www.bioleaf.com.cn   时间:2019-03-26

    我们在做elisa实验中应当注意很多问题,比如样品稀释、试剂盒平衡、样品和试剂的混匀、加样、温育等问题这些都是要向注意的,我们都知道Elisa试剂盒准确高,灵敏度高等优点,深受用户的喜爱!
 
    Elisa方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定.在Elisa测定中影响要素较多,在检测过程中除正常反响外,有经常见到一些错误的成果.引起ELISA测定错误成果的原因主要有:标本要素;试剂要素;操作要素.
 
    一、样品稀释
 
    一般产品的样品稀释倍数均经过很多实验确定,以确保实验的灵敏度和特异性.酶联免疫反响是一种敏感性很高的反响,如果血清不稀释,不可避免会产生很强的非特异性反响,出现假阳性.
 
    二、试剂盒平衡
 
    Elisa中所有试剂和板条均应在实验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20~30分钟以上.平衡时刻太短会造成试剂混匀不行,样品孵育时刻相对缩短,ELISA反响不行充沛.冬天室温低,可将试剂盒置37℃温箱20分钟.
 
    三、样品和试剂的混匀
 
    在稀释前、后的样品有必要充沛混匀,所有试剂在加样前也须摇匀,以确保实验的均一性.
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